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Caracterização funcional de homólogos à proteína de ligação a Cauda Poli-A (PABP) de Leishmania major

by da Costa, Tamara de?Carli

Abstract (Summary)
A proteína de ligação à cauda poli-A (PABP) se liga a seqüência de poli adenosinas presente na extremidade 3? do mRNA e possui uma multiplicidade de funções dentro da célula. Dentre as funções atribuídas a PABP destaca-se sua participação em eventos da síntese de proteínas, tais como iniciação e terminação da tradução e reciclagem dosribossomos, e seu envolvimento no transporte de alguns mRNAs do núcleo para o citoplasma. O objetivo deste trabalho é caracterizar homólogos de proteínas relevantes à iniciação da tradução em tripanosomatídeos. O estudo da PABP teve início com a busca em bancos de dados de L. major de possíveis homólogos, onde foi encontrado tanto o homólogo previamente descrito (LmPABP1) como mais dois homólogos(LmPABP2 e LmPABP3), sendo que o último não possui ortólogos em Trypanosoma. Os três genes foram amplificados, clonados, as proteínas expressas e utilizadas para produção de soro policlonal. Em seguida foi realizada a quantificação dos níveis intracelulares das três proteínas em extratos da forma promastigota de L. major sendo a LmPABP2 a maisabundante, a LmPABP3 em níveis intermediários e a LmPABP1 a menos abundante. No entanto, as LmPABP2-3 são detectadas com uma única forma, enquanto que a LmPABP1 está presente em duas isoformas, provavelmente uma delas devido a fosforilação. Análises da expressão durante o ciclo evolutivo do parasita mostrou que as três proteínasencontravam-se presentes em todas as formas evolutivas, porém a LmPABP3 mostrou um decréscimo na fase estacionária de crescimento e a LmPABP1 apresenta-se fosforilada apenas nas primeiras horas após o repique. Experimentos de localização subcelular indicam que a LmPABP1está presente na fração citoplasmática, enquanto que LmPABP2-3 estão presentes tanto na fração citoplasmática quanto na nuclear, porém com predominância da fração nuclear. Estudos adicionais precisam ser feitos pra entender como estas proteínas diferem funcionalmente e quais seuspapéis na síntese protéica
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Bibliographical Information:

Advisor:Norma Lucena Cavalcanti Licinio da Silva

School:Universidade Federal de Pernambuco

School Location:Brazil

Source Type:Master's Thesis

Keywords:Iniciação da tradução

ISBN:

Date of Publication:04/27/2007

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