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Detecção e localização de proteínas relacionados às MRJPs e de suas possíveis proteínas sítio-ligantes no cérebro e glândula hipofaringeal da abelha Apis mellifera

by Peixoto, Leonardo Gomes

Abstract (Summary)
RESUMO GERALAs MRJPs são as principais proteínas hidrossolúveis da geléia real da abelhaApis mellifera L. Neste trabalho, detectou-se e imunolocalizou-se proteínasrelacionados às MRJPs e suas possíveis proteínas sítio-ligantes no cérebro eglândula hipofaringeal da abelha Apis mellifera. Polipeptídeos de massa molecularde 57, 70 foram correlacionados às MRJP1 e MRJP3 e o polipeptídio de massamolecular de 128kDa um novo polipeptídeo possivelmente relacionado a essafamília de proteínas foram encontrados nas regiões analisadas do cérebro dessaabelha. Alem disso, 21 peptídeos, gerados por phage displays, foram utilizadosem bioinformática para analisar as regiões antigênicas da MRJP1, as quais serepetiram nas outras MRJPs analisadas, bem como localizar possíveis proteínassítio-ligantes com as MRJPs no sistema nervoso da abelha. Esses resultadostrazem uma importante contribuição para a compreensão do papel biológico destainteressante família de proteínas nos teciodo da abelha A. mellifera.RESUMO - CAPÍTULO IAs principais proteínas da geléia real (MRJPs) são uma família única de proteínasda abelha Apis mellifera, as quais são altamente expressa na glândulahipofaringeal das abelhas operárias. Para identificar proteínas relacionadas àsMRJPs no sistema nervoso destas abelhas, anticorpos foram imunopurificados etestados para revelar polipeptídeos que são reativos a estes anticorpos nocérebro e glândula hipofaringeal desta abelha. As identidades entre asseqüências das MRJPs foram analisadas por bioinformática, e a distribuição dasMRJPs nestes tecidos foram testados imunohistoquimicamente. Dentre asespécies de himenópteros investigados somente a A. mellfiera mostrou reaçãocruzada dos polipeptídios com os anticorpos anti-MRJP1 e o anti-MRJPtotal. Trêspolipeptídios, p57, p70 e p128, foram detectados na cabeça, cérebro e glândulahipofaringeal desta abelha, apresentado diferenças entre castas, idade e regiõesinvestigadas do cérebro. Esses resultados mostraram: a) O p57 foi o únicopolipeptídio imunoprecipitado pelo anti-MRJP1 sugerindo que esse polipeptídiopode estar relacionado com uma proteína específica do cérebro MRJP1; b) Op70, baseado na massa molecular relativa, pode estar relacionado com a MRJP3e c) o p128 é um novo polipeptídio relacionado às MRJPs em regiões do cérebroda abelha e glândula hipofaringeal detectado com o anti-MRJP total e anti-MRJP1mostrando a localização das MRJPs nas diferentes áreas como os corpos decogumelo, lobos antenal e ópticos e com uma forte marcação na glândulahipofaringeal. Neste estudo, nós mostramos polipeptídios imunoreativos comanticorpos para as MRJPs no cérebro e glândula hipofaringeal da A. mellifera. Alocalização das MRJPs em regiões do cérebro pode contribuir para elucidar opapel biológico desta família de proteínas desta abelha.RESUMO - CAPÍTULO IIAs MRJPs são as principais proteínas hidrossolúveis da geléia real da abelhaApis mellifera L., com homologia restrita às proteínas Yellow descritas paraDrosophila melanogaster. Os transcritos das MRJPs encontrados no cérebro daabelha operária e a localização das MRJPs em regiões específicas do cérebro daA. mellifera abriram perspectivas para o estudo de proteínas relacionadas àsMRJPs no sistema nervoso da abelha. As regiões antigênicas da MRJP1 e apresença de proteínas sítio-ligantes com as MRJPs no cérebro da abelha foraminvestigadas a partir dos 21 peptídeos selecionados por Biopanning e gerados porphage display. O pool desses peptídeos foi usado como sonda paraimunolocalizar proteínas sítio-ligantes com a MRJP1. Os sítios mapeados nessaproteína apresentaram-se repetidos em todas as outras MRJPs analisadas.Imunodetectou-se por Western blotting, das amostras dos fagos selecionados, ospeptídeos imunoreativos que mimetizaram as regiões antigênicas da MRJP1.Imunolocalizou-se nos corpos de cogumelo, lobos ópticos e glândula hipofaringealde todas as castas da abelha A. mellifera proteínas imunoreativas ao pool dospeptídeos gerados contra as MRJPs. Os resultados do presente estudo indicam apresença de proteínas sítio-ligantes com as MRJPs no sistema nervoso daabelha, sugerindo uma nova interação dessas proteínas com seus ligantes nocérebro da abelha A. mellifera.
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Bibliographical Information:

Advisor:Foued Salmen Espindola; Mario Sergio Palma; Klaus Hartmann Hartfelder

School:Universidade Federal de Uberlândia

School Location:Brazil

Source Type:Master's Thesis

Keywords:Cérebro da abelha Geléia real Glândula hipofaringeal Abelhas

ISBN:

Date of Publication:02/28/2006

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