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Seleção e caracterização de peptídeos recombinantesligantes a anticorpos monoclonais reativos a proteínas de Anaplasma marginale

by Borges da, Vanessa Rodrigues

Abstract (Summary)
Anaplasmose bovina é uma infecção causada por Anaplasma marginalee A. centrale. A espécie mais patogênica e de maior importância para bovinos éa A. marginale e está amplamente distribuída nas regiões tropicais,subtropicais e temperada do mundo. A. marginale é uma rickettsia intraeritrocitáriade ruminantes susceptíveis, transmitido biológica e mecanicamentepor carrapatos e insetos hematófagos. O carrapato Rhipicephalus (Boophilus)microplus é o principal transmissor de A. marginale no Brasil. A formacongênita de transmissão em bovinos pode ocorrer, ocasionando aanaplasmose neonatal. A membrana externa do A. marginale inclui seisproteínas principais de superfície (MSPs) bem caracterizadas, designadas deMSP1a, MSP1b, MSP2, MSP3, MSP4 e MSP5 e desempenham papelimportante no desenvolvimento da resposta imune de animais infectados. Parao desenvolvimento deste estudo, foi utilizada a técnica de Phage Display paraidentificar peptídeos ligantes a anticorpos monoclonais reativos a proteínas deAnaplasma marginale a partir de bibliotecas de peptídeos recombinantes pormeio da tecnologia Phage Display. Para seleção dos peptídeos foi realizadouma seleção subtrativa utilizando uma biblioteca de peptídeos com 12aminoácidos randômicos, Ph.D.-12, expressa na superfície do fago filamentosoM13 concomitantemente contra os anticorpos anti-MSP1a e anti-MSP2. Apósquatro ciclos de seleção e validação por ELISA, o conjunto de peptídeosselecionados apresentou ser unicamente reconhecido pelo anticorpo anti-MSP1. Análises de bioinformática identificaram 45 peptídeos, queapresentaram o motivo proteico consenso STxS, representado em 78% dosfagos seqüenciados. Devido aos múltiplos sítios repetidos encontrados naproteína MSP1, o motivo proteíco STSSxL pode ser um importante alvobiológico, com potencial utilização em ensaios diagnósticos e vacinais para ocontrole de Anaplasma marginale.
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Bibliographical Information:

Advisor:Luiz Ricardo Goulart Filho; Malcon Antonio Manfredi Brandeburgo; Carlos Henrique Marchiori; Guilherme Rocha Lino de Souza

School:Universidade Federal de Uberlândia

School Location:Brazil

Source Type:Master's Thesis

Keywords:anaplasma marginale msp1 phage display genetica genética molecular

ISBN:

Date of Publication:06/30/2008

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