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Detecção de genes e expressão enzimática em cultivares dearroz (Oryza sativa L.) crescidas sob estresse salino

by Graça de, Maria da

Abstract (Summary)
No Rio Grande do Sul, o principal sistema de irrigação da cultura do arroz é porinundação, podendo conduzir à salinização os solos com drenagem inadequada,especialmente as lavouras da região litorânea que utilizam a água da Laguna dosPatos, que está sujeita à salinização pela entrada do mar quando é baixo o nívelda referida Laguna, tornando-se uma das maiores limitações ambientais naprodução de arroz. Esta pesquisa teve como objetivos analisar a expressãoenzimática de cultivares de Oryza sativa L. ssp. indica S. Kato e Oryza sativa L.ssp. japonica S. Kato, crescidas em diferentes níveis de salinidade e detectargenes envolvidos com a tolerância à salinidade, com base na hipótese de que ascultivares da Segunda subespécie apresentam maior tolerância à salinidade. Noexperimento foram utilizadas as cultivares BRS Bojuru, IAS 12-9 Formosa eGoyakuman pertencentes à O. sativa ssp. japonica e as cultivares de O. sativassp. indica BRS-7 Taim, BRS Querência e BRS Atalanta. As plântulas de arrozcom 10 dias após a emergência (DAE) foram transferidas para casa de vegetaçãocom temperatura e umidade controlada e crescidas em bacias de 15 L, contendosolução nutritiva de Hoagland meia força acrescida de 0, 25, 50, 75 e 100 mM deNaCl. As plântulas foram coletadas aos 14, 28, 42 e 56 dias após a transferência(DAT) e imediatamente armazenadas em ultrafreezer à -70 °C para posterior anáxiv-lises. Os tecidos vegetais foram macerados e colocados em tubos eppendorfcom solução extratora de Scandálios. A eletroforese foi realizada em géis depoliacrilamida 7% colocados em cubas eletroforéticas verticais. As bandasforam reveladas para os sistemas enzimáticos superóxido dismutase,peroxidase, catalase, esterase, glutamato desidrogenase, álcooldesidrogenase, fosfoglucose isomerase, malato desidrogenase, enzima málica,alfa amilase e glucose-6-fosfato desidrogenase. Por intermédio de pesquisa insilico, realizada junto ao National Center for Biotechnology Information foramidentificados os genes AY785147 ? SOS e AF319481 - CK1, envolvidos natolerância a salinidade. A detecção dos genes consistiu da extração de DNAgenômico segundo o método CTAB 2%, seguido de reações de PCRrealizadas em termociclador mediante a utilização dos primers desenhadostambém in silico. Os produtos da amplificação foram detectados poreletroforese em gel de agarose 1,5%. A visualização do DNA corado combrometo de etídio foi feita sobre iluminação ultravioleta e as imagensdigitalizadas. A expressão das enzimas envolvidas nos mecanismos detolerância ao estresse salino é maior em O. sativa ssp. japonica. Fragmento dogene SOS1 foi encontrado em todas cultivares, com exceção da BRS Atalantae o gene CK1 está presente em todas as cultivares avaliadas. Conclui-se queos sistemas enzimáticos são mais expressos nas cultivares de O. sativa ssp.japonica, nas folhas e aos 14 DAT, apresentando bandas mais intensasconforme o aumento da salinidade. A expressão das enzimas envolvidas nosmecanismos de tolerância ao estresse salino é maior em O. sativa ssp.japonica e os genes estudados estão presentes nas duas subespécies.
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Bibliographical Information:

Advisor:Nei Fernandes Lopes; Dario Munt de Moraes; Paulo Dejalma Zimmer

School:Universidade Federal de Pelotas

School Location:Brazil

Source Type:Master's Thesis

Keywords:padrões eletroforéticos arroz FISIOLOGIA VEGETAL

ISBN:

Date of Publication:07/18/2008

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