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?Análise de frações antigênicas da forma metacestódea de Taenia solium, obtidas pelo Triton X-114 e por cromatografia de afinidade, no diagnóstico sorológico da neurocisticercose humana?

by Machado, Gleyce Alves

Abstract (Summary)
A neurocisticercose (NC) causada pela forma metacestódea de Taenia soliumfreqüentemente acomete o sistema nervoso central podendo ser confundida com outrassíndromes neurológicas. O diagnóstico sorológico da NC é de grande importância narotina laboratorial porque auxilia no diagnóstico de pacientes que apresentam sinaisclínicos e radiológicos compatíveis com esta doença. A utilização de antígenospurificados tem permitido o desenvolvimento de testes mais sensíveis e específicos,resultando em estudos soroepidemiológicos e de triagem mais confiáveis. Processos depurificação antigênica utilizando Triton X-114 (TX-114) e cromatografia de afinidadeconsistem em técnicas simples e de baixo custo. O objetivo deste estudo foi caracterizare comparar diferentes frações antigênicas da forma metacestódea de T. solium obtidospor separação de fases usando TX-114 e cromatografia de afinidade para osorodiagnóstico da NC humana. Foram analisadas 132 amostras de soro, sendo 40 depacientes com NC, 62 de pacientes com outras parasitoses e 30 de indivíduosaparentemente saudáveis. O extrato salino total (S) e o líquido de vesícula (LV) foramsubmetidos ao processo de fracionamento utilizando TX-114 para a obtenção dasfrações antigênicas: detergente (DS e DLV, respectivamente) e aquosa (AS e ALV,respectivamente). O extrato S foi purificado em colunas de jacalina e N-acetilglicosamina,sendo apenas a fração não ligante de jacalina (FNL-J) submetida à colunade concanavalina A (ConA) e fracionamento com TX-114. Todos antígenos foramanalisados em SDS-PAGE 12% e corados pela prata para visualização das bandasantigênicas. As amostras de soro foram avaliadas para detecção de IgG pelo testeELISA na diluição de 1:200 e pelo immunoblotting na diluição de 1:100. Sensibilidade,especificidade, eficiência do diagnóstico e Índice de Youden foram calculados para oteste ELISA. As sensibilidades e especificidades dos testes ELISA foram: 92,5% e84,8% (S); 92,5% e 92,4% (DS); 67,5% e 70,6% (AS); 82,5% e 85,9% (LV); 77,5% e72,8% (DLV); 80,0% e 80,4% (ALV); 85,0% e 84,8% (FNL-J); 92,5% e 93,5%(DFNL-J); 82,5% e 82,6% (AFNL-J), respectivamente. A eficiência do diagnóstico e oÍndice de Youden dos testes ELISA foram: 87,1% e 0,77 (S); 92,4% e 0,85 (DS); 69,7%e 0,38 (AS); 84,8% e 0,68 (LV); 74,2% e 0,50 (DLV); 80,3% e 0,60 (ALV); 84,8% e0,70 (FNL-J); 93,2% e 0,86 (DFNL-J); 82,6% e 0,65% (AFNL-J), respectivamente. Noimmunoblotting a banda de 70-50 kDa foi detectada em todas as amostras de soro depacientes com NC para a fração DFNL-J, enquanto nenhuma reatividade foi observadapara esta fração antigênica nas amostras de pacientes com outras parasitoses ouindivíduos saudáveis. Concluindo, a fração DFNL-J foi mais sensível e específica queos outros extratos, sendo capaz de diferenciar pacientes com NC daqueles com outrasparasitoses, particularmente nas infecções por Echinococcus granulosus.
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Bibliographical Information:

Advisor:Julia Maria Costa-Cruz; Ernesto Akio Taketomi; Jose Roberto Mineo; Foued Salmen Espindola; Mário Leon Silva Vergara; Osvaldo Massaiti Takayanagui

School:Universidade Federal de Uberlândia

School Location:Brazil

Source Type:Master's Thesis

Keywords:Cromatografia de afinidade IMUNOLOGIA APLICADA

ISBN:

Date of Publication:03/25/2008

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