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Papel del estudio genético en el despistaje y el diagnóstico de la hemocromatosis hereditaria

by Blesa Salvatierra, Irene

Abstract (Summary)
PAPEL DEL ESTUDIO GENÉTICO EN EL DESPISTAJE Y EL DIAGNÓSTICO DE LA HEMOCROMATOSIS HEREDITARIA. La Hemocromatosis Hereditaria (HH) es una enfermedad genética afltosómica recesiva vinculada al gen HFE que ocasiona un defecto en el metabolismo del hierro, con una hiperabsorción del mismo, produciendo unos depósitos elevados y patológicos en higado, corazón, páncreas, y ocasionando daño en cada uno de estos organos. El diagnóstico de HH se realiza mediante la cuantificación de hierro en la biopsia hepática o por el estudio de las mutaciones del gen HFE. Se ha observado que un alto % de pacientes con HH presentan la mutación C282Y y en menor cflantia la H63D. Pero hay variabilidad entre diferentes poblaciones e incluso dentro de un mismo pais. La HH es el desorden genético más común en individuos de raza caucásica y de origen céltico, con una prevalencia media de 2-5/1000, y es más frecuente en individuos del norte de Europa y sus descendientes. Protocolo l: Objetivo: Determinar la incidencia de las mutaciones genéticas del gen HFE en una población de pacientes estudiados en el hospital de Sant Pau que presentaban sobrecarga de hierro. Paciente: Para esto se estudiaron los pacientes que acudieron al Hospital de Sant Pau de manera consecutiva en un periodo de tres meses, que presentaban sobrecarga férrica con IST>50% y ferritina>450ng/l y a los que se determinaron las mutaciones del gen HFE. Métodos: el gen HFE se amplificó mediante PCR, y el ADN se digirió con enzimas de restricción Rsal (C282Y) y Mbol (H63D).Los fragmentos se valoraron por electroforesis en geles de agarosa. Resultados: De los 55 pacientes estudiados, 3 pacientes(5,45%) fueron homocigotos para la mutación C282Y y 2 pacientes (3,6%) eran heterocigotos para las 2 mutaciones. Por lo tanto, 5 de 55 pacientes (9%) presentaban las mutaciones genéticas diagnósticas de HH. Protocolo ll: Objetivo:Determinar la incidencia de las mutaciones genéticas responsables de la HH y su relación con la concentración de hierro en higado en pacientes biopsiados en el Hospital de Sant Pau por sospecha de HH. Pacientes: Se incluyeron 78 pacientes con indica de saturacion de transferrina (IST) >50% y ferritina >450,ug/l a los que se les habla practicado una biopsia hepática para cuantificación del hierro, entre 1980 y 1999. Y se clasificaron según el indica de hierro hepático (IHH) en tres grupos: Grupo I con IHH>1,9; Grupo II con IHH entre 1 y 1,9; y GrupoIII con IHH <1. Métodos: El estudio de las mutaciones del gen HFE se realizó como en el protocolo I y la cuantificación de hierro en biopsia hepática se valoró mediante desecación y colorimetria. Resultados: En el grupo 1, 26 de los 31 pacientes (83,85%) tenian una mutación relacionada con HH; 24 pacientes (77,4%) eran homocigotos para la mutación C282Y y 2 (6,45%) eran heterocigotos para las 2 mutaciones. De los 5 pacientes restantes, 4 (12,9%) eran homocigotos para la mutación H63D y un paciente (3,22%) era heterocigoto para la mutación H63D.En el segundo grupo de los 7 pacientes, 2 (28,57%) eran homocigotos para la mutación C282Y, y otros 2 pacientes eran heterocigotos para las dos mutaciones. Los restantes 3 pacientes tenían genotipo normal.En el grupo III con IHH<1, ninguno de los 40 pacientes era homocigoto para la mutación C282Y, 4 (10%) eran dobles heterocigotos, 3 pacientes (7,5%) eran homocigotos para la mutación H63D, 15 (37,5%) eran heterocigotos para la mutación H63D y 17 (42,5%) tenian un genotipo normal. Pero si tenemos en cuenta los criterios histológicos y genéticos, 39 pacientes fueron diagnósticados de HH, ocho de estos pacientes (20,5%) no cflmplian los criterios histológicos de HH, por lo que el estudio genético nos permitió establecer el diagnóstico de HH en estos pacientes. En definitiva en el presente estudio se puede observar que el 87,17% de los pacientes con HH tienen las mutaciones descritas, siendo el 66,6% de los pacientes homocigotos para la mutación C282Y y el 20,5% dobles heterocigotos. Solo 5 pacientes del total de 39 con diagnóstico de HH (12,8%), no presentaban las mutaciones diagnósticas de HH. Protocolo III: Objetivo: Evaluar el papel de la mutación S65C del gen HFE en pacientes con HH que son negativos para las otras dos mutaciones, con el fin de conocer la frecuencia de esta mutación en nuestra área. Pacientes: Se realizó la mutación S65C en 141 pacientes, en los que se descartó la homocigocia C282Y y los dobles heterocigotos. Y se dividieron en 2 grupos: Grupo l: 41 pacientes con sobrecarga de hierro y Grupo ll: 100 pacientes sin sobrecarga de hierro. Métodos:el ADN se digirió con la enzima de restricción Hinf-l y los fragmentos se valoraron por electroforesis en geles de agarosa. Resultados:Solo un paciente de los 41 casos del primer grupo con sobrecarga de hierro fue heterocigoto para la mutación S65C y normal para las otras dos mutaciones. Ninguno de los pacientes del segundo grupo presentó esta mutación Protocolo IV: Se realizó un protocolo institucional de trabajo para la HH en el Hospital de Sant Pan. Conclusiones:-EI 9% de los pacientes con sobrecarga férrica (ISTy ferritina sérica elevados) que acudieron al hospital presentan mutaciones genéticas diagnósticas de HH. -En los pacientes con indica de hierro hepático IHH >1,9, el 83,85% presentaron una mutación compatible con HH (77,4% homocigotos para la mutación C282Y y 6,45% heterocigotos para las dos mutaciones). -El 12,9% de los pacientes con IHH >1,9 eran homocigotos para la mutación H63D. -Hay un porcentaje de pacientes (16,12%) que tienen criterios histológicos de sobrecarga férrica con IHH>1,9, pero no tienen las mutaciones diagnósticas de HH. -Existe un 20,5% de pacientes con mutaciones genéticas diagnósticas de HH que no cumplen los criterios histológicos cuantitativos de la enfermedad. -En nuestro estudio, el 87,17% de los pacientes diagnosticados de HH, (teniendo en cuenta criterios genéticos e histológicos) tenian mutaciones genéticas compatibles con HH (66,6% homocigotos para la mutación C282Y y 20,51% dobles heterocigotos). -La mutación S65C del gen HFE es muy poco frecuente en los pacientes con sobrecarga férrica en nuestra área geográfica.
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Bibliographical Information:

Advisor:Carlos Guarner Aguilar; Angel F. Remacha

School:Universitat Autónoma de Barcelona

School Location:Spain

Source Type:Master's Thesis

Keywords:417 departament de medicina

ISBN:

Date of Publication:12/19/2000

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