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PO41, uma anti-hemorragina presente no soro de Philander opossum: isolamento, caracterização e interação com metaloproteases isoladas do veneno de Bothrops jararaca.

by Jurgilas, Patricía Barbosa

Abstract (Summary)
Em 1994, Perales e colaboradores isolaram e caracterizaramparcialmente frações antibotrópicas (FAB) do soro de váriosmarsupiais brasileiros, dentre eles o Didelphis marsupialis (DM) e o Philander opossum (PO). No presente trabalho, objetivamos isolar e caracterizar o fator anti-hemorrágico de Philander opossum. Além disto, para o estudo da capacidade inibitória deste fator sobre metaloproteases, desenvolvemos uma nova metodologia de isolamento destas enzimas, jararagina e botrolisina, a partir do veneno de Bothrops jararaca. A proteína anti-hemorrágica isolada foi denominada de PO41, pois apresentou 41,330 u.m.a. por MALDI-TOF. Por filtração em gel verificamos que esta proteína possuia massa molecular de 61,5kDa e apresentou identidade nos 27 resíduos N-terminais com dois inibidores isolados do soro de Didelphis marsupialis, DM40 e DM43. Por imunotransferência, obtivemos padrões de mobilidade idênticos quando revelamos PO41 e DM43, com anticorpo policlonal preparado contra a fração antibotrópica de Didelphis marsupilais. Por focalização isoelétrica estimamos para PO41 ponto isoelétrico abaixo de 3,5. PO41 foi capaz de formar complexos não-covalentes com as enzimas isoladas do veneno de Bothrops jararaca. As atividades proteolíticas e hemorrágicas destas enzimas também foram inibidas por PO41. Nossos resultados sugerem que PO41 é um inibidor de metaloproteases de venenos de serpentes e possui propriedades físico-químicas, estruturais, de imunoreatividade e biológicas similares às dos inibidores pertencentes a superfamília gênica das imunoglobulinas.
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Bibliographical Information:

Advisor:Gilberto Barbosa Domont; Jonas Enrique Aguilar Perales

School:Faculdades Oswaldo Cruz

School Location:Brazil

Source Type:Master's Thesis

Keywords:BIOLOGIA MOLECULAR

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Date of Publication:

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