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Isolamento e identificação de Coccidioides immitis de amostras de solo relacionadas a surtos de coccidioidomicose.

by Lima de, Regina Célia

Abstract (Summary)
A coccidioidomicose (CM) é micose sistêmica endêmica no semi-árido do nordeste brasileiro causada pelo fungo dimórfico geofílico Coccidioides immitis non-CA [=C. posadasii]. No Brasil a principal característica epidemiológica relacionada a surtos da CM aguda é o distúrbio ambiental provocado por caçadores de tatus que, ao desentocarem o animal de seu habitat, revolvem solo contaminado e se infectam ao inalar propágulos (artroconídios) do fungo dispersos na poeira do ar, desencadeando o processo de infecção e doença. O presente trabalho teve como objetivos (i) Isolar e identificar por metodologias clássicas agentes de micoses sistêmicas em amostras ambientais relacionadas a surtos de CM; (ii) Avaliar a eficiência de protocolos para extração de DNA a partir das amostras ambientais utilizando duas metodologias distintas: a) criofratura com nitrogênio líquido e b) kit de extração comercial Fast DNA® SPIN® Kit For Soil Q-BIOgene; (iii) Desenvolver iniciadores específicos para a detecção de C. immitis non-CA utilizando recursos de bioinformática; (iv) Avaliar e validar os iniciadores específicos, utilizando-os na detecção de C. immitis non-CA em DNAs de amostras de solo. Foram analisadas por estas metodologias amostras ambientais de dois sítios suspeitos de contaminação por C. immitis non-CA. De 10 amostras de solo coletadas em Elesbão Veloso, 3 (30%) foram positivas para C. immitis non-CA por inoculação animal, 2 (20%) foram positivas pela PCR direta e 10 (100%) foram positivas no rastreamento com a técnica de PCR semi-nested. De 23 amostras de solo coletadas em Caridade do Piauí, 3 (13,3%) foram positivas para C. immitis non-CA por inoculação animal, 6 (42,8%) de 14 amostras foram positivas pela PCR direta e todas estas 14 amostras (100%) foram positivas no rastreamento com a PCR semi-nested. Esta metodologia possibilita disponibilizar uma técnica molecular de detecção de C. immitis non-CA em amostras ambientais, de execução simples, sensível e específica e, com isso, possibilitar a determinação da distribuição de ecótopos deste agente nas áreas endêmicas. Além disso, pode ser utilizada na identificação de isolados clínicos e ambientais de C. immitis non-CA.
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Bibliographical Information:

Advisor:Bodo Wanke; Marcia dos Santos Lazéra

School:Faculdades Oswaldo Cruz

School Location:Brazil

Source Type:Master's Thesis

Keywords:genetica molecular e de microorganismos coccidioides coccidioidomicose coccidioidomycosis

ISBN:

Date of Publication:08/31/2006

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