Estudo imunoistoquímico comparativo entre seis anticorpos anti-her2 emarrays de carcinomas mamários: correlação com hibridação insitu cromogênica e avaliação interobservador

by Nunes, Cristiana Buzelin

OBJETIVOS: Comparar o novo anticorpo monoclonal de coelho com anticorpos monoclonais de camundongo e policlonais de coelho para avaliação do Her2 empregando arrays de carcinomas mamários correlacionando os resultados com a reação de hibridação in situ cromogênica (CISH) e avaliar a concordância interobservador na interpretação das reações. MATERIAL E M�TODOS: Cortes seqüenciais de arrays contendo 84 carcinomas mamários foram submetidos à técnica imunoistoquímica empregando-se o SP3 (NeoMarkers), anticorpos policlonais de coelho HercepTest e A0485 (Dako), anticorposmonoclonais de camundongo CB11 (Novpcastra e CellMarque) e 4D5 (Genentech), e ao CISH (kit HER2 Spot-Light� da Zymed). As reações foram realizadas em duplicata e avaliadas duplo cego empregando-se o sistema de graduação do HercepTest para as reações imunoistoquímicas e o guia de interpretação do HER2 da Zymed para o CISH. Para a avaliação da concordância interobservador, uma lâmina corada por cada anticorpo foi submetida à avaliação individual por cinco observadores, e os resultados separados em três análises: I (0; 1+; 2+; 3+); II (0 e 1+; 2+ e 3+) e III (0 e 1+; 2+; 3+), e aplicado o teste estatístico de Kappa. RESULTADOS: No estudo comparativo entre os anticorpos, a melhor concordância foi entre SP3 e HercepTest (kappa=0,74). Os anticorpos SP3, A0485 e HercepTest detectaram todos os casos amplificados pelo CISH. Cinco casos não amplificados (13%) receberam escore 3+ utilizando SP3, 2 casos (5,3%), utilizandoHercepTest, e 10 casos (26,3%) utilizando A0485. Três casos amplificados (6,5%) foram negativos pelo CB11 e 1 caso (2,2%) foi negativo para o 4D5. A concordância interobservador foi boa quando os casos foram avaliados na análise I (0; 1+; 2+; 3+). Quando foram avaliados na análise II (0 e 1+, 2+ e 3+), a concordância interobservador foi boa nos casos corados por SP3 e CB11, e muito boa nos casos corados por A0485, HercepTest e 4D5. Na análise III (0 e 1+; 2+; 3+), foi observada concordância interobservador moderada para o os casos corados pelo anticorpo CB11, e boa para os casos corados pelos outros anticorpos. CONCLUS�ES: O novo anticorpo SP3 é mais sensível do que os anticorpos monoclonais CB11 e 4D5 para a detecção de Her2. Os anticorpos HercepTest, CB11 e 4D5 mostram maior especificidade do que o SP3. A concordância interobservador foi considerada entre moderada e muito boa nos casos corados pelos cinco anticorpos. A menor concordância interobservador ocorreu nos casos de marcação fraca (1+) e moderada (2+).