Devenlopment of displacement electrochemical inmunosensors: the case of 2,4,6-trichloroanisole

by Duarte, Maria Viviana

Resumen El objetivo de este trabajo es explorar y explotar los principios de funcionamiento de un Inmunosensor Electroquímico de Desplazamiento [(Displacement Electrochemical Immunosensor (DEI)] y también del ELISA Indirecto Competitivo [(Indirect Competitive ELISA (ICE)] para la detección de 2,4,6-tricloroanisol (TCA). Para tal fin, se lleva a cabo el desarrollo racional de un ELISA Indirecto Competitivo. El ensayo desarrollado resulta capaz de detectar TCA en concentraciones 1ppt a 1 ppm, con un limite de detección de 4.2 ppt. El ensayo desarrollado puede tener un particular interés comercial en situaciones donde el tiempo experimental requerido es de menos de 80 minutos. Se desarrolla también un modelo matemático (MM) cuyo principal objetivo es permitir el desarrollo racional de un Inmunosensor Electroquímico de Desplazamiento (DEI). A pesar de las bajas constantes de afinidad observadas en los anticuerpos obtenidos para este trabajo, se logra desarrollar un DEI funcional cuyo limite de detección de TCA (0.2 ppm) se corresponde con los valores obtenidos a través del MM. La adsorción inespecífica (NSA) de proteínas es identificada como uno de los problemas críticos que impidieron alcanzar limites de detección más bajos. El uso del electroquímicamente compatible Cu UPD como barrera/control de la NSA, junto con la detección amperométrica del desplazamiento son propuestos en este trabajo como base o punto de partida para el desarrollo de inmunosensores que puedan ser operados sin necesidad de marcaje (labelling) o la adición de otros componentes diferentes de la muestra de interés (reagentless and labelless immunosensors). Development of displacement electrochemical immunosensors: The case of 2, 4, 6-trichloroanisole Maria Viviana DUARTE Tarragona, December 2007