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Desenvolvimento e avaliação de um biossensor amperometrico a base de peroxidase para determinação de neurotransmissores

by de Castilho, Tania Jacometo

Abstract (Summary)
Sendo os neurotransmissores compostos que desempenham papel importante no organismo humano, a análise dos mesmos é revestida de um interesse especial nas áreas médica e farmacêutica. A análise de neurotransmissores, utilizando um biossensor à base de peroxidase (HRP) imobilizada em pasta de carbono, pode ser uma alternativa às técnicas tradicionais de análise que são pouco seletivas (fluorimétrica), muito caras (CG-MS) ou demoradas (HPLC-ED). Estes fatores as tomam pouco adequadas para análises rápidas. Assim, esta tese refere-se ao desenvolvimento de um biossensor à base de peroxidase imobilizada em pasta de carbono para a determinação de neurotransmissores em amostras biológicas. Na construção do biossensor foram realizados oito procedimentos diferentes para imobilizar a enzima HRP e todas as condições experimentais determinadas, usando uma solução do neurotransmissor serotonina como composto de referência. Foram avaliados os valores de sensibilidade obtidos com a adição de glutaraldeído, albumina de soro bovino e a ativação da grafite com carbodiimida no processo de imobilização enzimática. -Os resultados indicaram que a composição da pasta tem grande influência na atividade da enzima imobilizada para catalisar a oxidação da serotonina. Os melhores resultados foram obtidos em tampão fosfato 0,1 moI L-I (pH = 7,0), contendo 10 !lmoI L-I de peróxido de hidrogênio, aplicando-se o potencial-50 mV vs ECS. Nestas condições, o biossensor apresentou resposta linear entre 0,2 e 2,0 fllIlol L-I, limite de detecção de 0,08 Ilmol L-I e tempo de resposta de 0,5 s. O biossensor apresentou sensibilidades semelhantes para a dopamina, a epinefrina e a norepinefrina. Para a serotonina a sensibilidade foi mais baixa, estando de acordo com o potencial redox mais elevado e ser esta substância um monofenol. O sensor proposto apresentou-se estável durante quatro horas de monitoramento, e uma diferença de resposta de 2% entre seis preparações. O biossensor foi aplicado com sucesso na determinação da concentração total de neurotransmissores em amostra de plasma sanguíneo de rato, sendo obtida uma recuperação de 102%
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Bibliographical Information:

Advisor:Lauro T. Kubota

School:Universidade Estadual de Campinas

School Location:Brazil

Source Type:Master's Thesis

Keywords:neurorreguladores serotonina biossensores

ISBN:

Date of Publication:09/08/2003

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